現(xiàn)代科學的發(fā)展開啟了腫瘤個性化治療新紀元。目前腫瘤治療過程中遇到的最大挑戰(zhàn)是如何確定不同患者的最佳治療藥物。傳統(tǒng)的檢測手段和經(jīng)驗用藥往往存在很大的個體療效差異，這也是腫瘤治療過程中的一大難題。

循環(huán)腫瘤細胞(Circulating Tumor Cell，CTC )是自發(fā)或因診療操作脫離實體瘤原發(fā)灶或轉(zhuǎn)移灶進入血液循環(huán)系統(tǒng)的腫瘤細胞。CTC是遠處器官轉(zhuǎn)移瘤的種子，與絕大多數(shù)癌癥的轉(zhuǎn)移復發(fā)相關(guān)。

1. 癌癥轉(zhuǎn)移機制

①細胞生長原位病灶     

②細胞突破基底膜

③入侵        

④隨血液流動        

⑤黏附在毛細血管壁上

⑥從血管中逃離（溢出） 

⑦通過增殖形成轉(zhuǎn)移

2. CTC的分類

CTC以不同形態(tài)存在于外周血中，既有游離的單個CTC，也有聚集成團的細胞團——腫瘤微栓子（Circulating Tumor Microemboli，CTM）。腫瘤細胞在進入外周血循環(huán)的過程中會發(fā)生上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)變（Epithelial Mesenchymal Transition，EMT），多數(shù)惡性腫瘤細胞在脫離原發(fā)灶的過程中發(fā)生EMT。研究表明，CTM和間質(zhì)細胞表型CTC具有更強的轉(zhuǎn)移潛能。

3. CTC的富集

液體活檢技術(shù)發(fā)展至今一直面臨的最大問題就是如何在樣本起始量有限的情況下獲取本來就極其稀少的物質(zhì)。前一篇講液體活檢“大馬車”ctDNA檢測的推文里提到ctDNA的特征：含量濃度低，而CTC的特征是游離細胞數(shù)量極少，每毫升血液里面含有的CTC 是個位數(shù)，而白細胞的數(shù)量級是106-107，紅細胞的數(shù)量則更多，高效分離和富集這些血液中的“不速之客”，是CTC檢測技術(shù)的基礎(chǔ)。

*從全血中分離CTC的方法

上圖直觀展示了三種捕獲CTC的方法：免疫親合法、物理特性富集、直接成像，較為成熟的是前兩種技術(shù)。免疫親和法主要是根據(jù)CTC 表面表達的特異性的蛋白將CTC 篩選出來，物理特性富集主要是根據(jù)CTC 的大小和密度等特性將這些細胞篩選出來。

總而言之，物理特性富集法中密度梯度離心和過濾法操作簡單，成本低廉，不依賴細胞表面抗體的表達，捕獲的細胞數(shù)量多，能夠克服CTC 在蛋白表達上的異質(zhì)性，但是無法克服CTC 在物理特性的異質(zhì)性。生化特性法操作復雜，成本相對更高。未來，兩者結(jié)合的微流控芯片將是CTC 分離富集發(fā)展的趨勢。

4. CTC檢測的臨床應用

4.1腫瘤輔助診斷

對尚未完善病理診斷的患者，CTC 可聯(lián)合影像學、血清學做為輔助判斷病灶良惡性的指標。同時，CTC是對原發(fā)灶與轉(zhuǎn)移灶信息的全面反映，可彌補現(xiàn)有傳統(tǒng)TNM 分期的不足，提示早期微轉(zhuǎn)移的存在風險。

*顯示了不同癌癥在7.5ml血中CTC計數(shù)的差異（橫坐標分別代表：健康捐助者、良性的疾病患者、轉(zhuǎn)移性前列腺癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、和其他癌癥患者）

4.2藥物療效評估與耐藥檢測

因其無創(chuàng)便捷的特性可對包括術(shù)前新輔助化療、術(shù)后輔助化療、晚期放化療、靶向治療、生物免疫治療等在內(nèi)的各階段治療進行實時監(jiān)測治療效果，不僅可以實時快速判斷療效，還可動態(tài)監(jiān)測耐藥發(fā)生。（建議治療前1-3天進行CTC計數(shù)檢測，治療后定期再次檢測，動態(tài)監(jiān)測治療效果）

4.3 預后評估

*根據(jù)(A)影像學緩解情況，(B)影像學檢查±1個月內(nèi)循環(huán)腫瘤細胞數(shù)目以及(C)影像學緩解情況結(jié)合影像學檢查±1個月內(nèi)CTC數(shù)目，分析轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者的總體生存狀況（總體生存期(OS)從基線采血時開始計算）

上圖的前瞻性多中心研究，采用免疫磁性分離法在基線時以及開始一線、二線或三線治療后對430例mCRC患者進行外周血CTC計數(shù)。治療前和治療期間的CTC數(shù)目是轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌患者PFS和OS的一項獨立預測因子。除影像學檢查外， CTC能夠提供更多的預后信息。

4.4復發(fā)轉(zhuǎn)移監(jiān)測

上述成果來自復旦大學的研究人員，在研究中觀察到手術(shù)后1個月，患者的CTC陽性率和CTC7.5(次方)值顯著下降。而CTC7.5(次方) 持續(xù)性<2的患者相比CTC7.5(次方) 持續(xù)性≥2的患者，前者復發(fā)率顯著較低。證實EpCAM+ CTC或可作為治療反應的一個實時監(jiān)控參數(shù)，并有可能是肝癌復發(fā)一個有潛力的治療靶點。

4.5個體化治療

上述四點應用從CTC計數(shù)層面提供預后預測、復發(fā)風險評估和療效監(jiān)測，更進一步的，分離CTC后，可連接下游的分子檢測技術(shù)，比如FISH平臺、PCR平臺、測序平臺等，來反映患者腫瘤的基因信息，指導個體化用藥。